在运输过程中,由于各种不同t3出行无法设定到达目的地怎么办的原因IVF 培养液可能会超过所规定的参数范围。这可
能对产品是有害的,但并非总是如此。在这个博客中,我将解释以下问题:当培养液过冷
或者过热,培养液会发生什么变化t3出行无法设定到达目的地怎么办?
这是正常的
培养液在设计时就要求能够经受几天内温度的升高,否则,培养液是不能用于IVF。
这些培养液是在室温下进行生产的,这使得原料能够很容易地溶解,直到培养液灌装入瓶
后,才进行低温储存。
我们主要的担忧是从培养液生产到培养液使用的这个时间段内所发生的事情,培养液
可能会经受太高或太低的温度。虽然正常情况下培养液的包装和运输是在正确的温度下进行的,但错误也有出现的可能。冷链也有可能会损坏,例如,冰箱性能异常、极端高温或低温,这就造成培养液到达生殖中心时,很难知道这个培养液是否是可以正常使用。
当温度超过了所规定的范围,培养液将会发生什么变化?
可能会出现两种主要的情况:培养液冻结或培养液温度太高。这两种情况都可能对培
养液造成不利的影响,但是并非总是如此。
培养液冻结
即使是温度低于0 ℃,培养液冻结也需要一定时间。运输过程中运输箱和蓄热体是双
向作用的,因此冷冻或温度升高也是缓慢的。在实际实验中,我们发现,即使运输箱内零
下6 ℃保持三个半小时,培养液仍然不会冻结。
即使运输箱内温度降到0 ℃以下,培养液也不会立即冻结,因为培养液很容易形成过
度冷却的溶液,而不会形成冰晶体。我们推荐的正常存储条件是+2~+8 ℃,但+2 ℃仅仅
是一个给定的安全界限,其目的是在某些环节出现问题时减少培养液冻结的风险。
当然,培养液最终肯定会发生冻结,此时培养液必须丢弃。发生冻结的培养液主要的
风险是,最初形成的冰晶几乎全部由纯水组成,随着冻结继续,培养液中没有发生冻结部
分的无机盐,蛋白质以及其他成分浓度就会增加。培养液将会变得性质不均一,当培养液
最终融化后将会带来风险,培养液也很难恢复到冻结前所有成分都充分溶解的状态。
由于未冻结的那部分培养液的pH 值和渗透压已经偏离了正常值,因此蛋白质可能也
会发生变性。如果您怀疑培养液已经发生过冻结和然后融化的过程,那么请您将瓶子轻轻
地摇晃并对光观察寻找有不同折射率的“线条”,因为冻结会使培养液浓度变得不均一,因
此溶液就会产生不同的折射率。
对光可观察到瓶子中的“线条”
当谈及冷冻时有一个例外,那就是培养油。当温度在0 ℃以下,培养油不会发生冻结,但可能会有一些浑浊。这是因为长链分子在冷油中的溶解性降低,但是一旦培养油重新变
热,它们会重新溶解,同时不会对产品造成任何的不利影响。
培养液过热
如果培养液在非低温下保存多一天,虽然培养液不会马上产生毒性,但是在一定程度
上培养液的功效会有所降低。一些培养液制造商会设定安全界限,制造商在做产品稳定性
试验时会稍微提高温度来模拟运输过程中可能出现的12 ℃持续一周的情况。
有些成分如无机盐不会降解。但维生素、碳水化合物和蛋白质将会降解,但只要培养
液保持避光,那么该过程是非常缓慢的。这个过程主要发生的是氧化反应,而且随着时间
的推移,培养液的活性成分将会减少。通过脱氨基作用,氨基酸和蛋白质会缓慢地释放铵
离子,而已知铵离子积累对胚胎有不利的影响。这个过程是缓慢的,因此,温度轻微上升
一天左右不会产生明显的影响,但如果长达一周的情况肯定会产生可能很重大的影响1。
如何计算降解率
导致降解的化学反应速率主要取决于反应物(主要是氧气)的浓度和溶液中可利用的
能量(温度)。
每个反应都有活化能,形象地讲就是两个分子的碰撞速度。如果它们相互撞击的速度
够快,就会发生反应,否则就不会发生反应。反应必要速度,或活化能,因化学反应不同
而各异,但我们可以取平均值83 kJ/mol,这个值与大多数反应的实际值相当接近。通过
使用阿伦尼乌斯方程,可以计算出这个反应速率:
在这里我们不对这个方程进行详细论述,如果把真实的数值填加到这个方程中,计算
的结果是,温度升高+10 ℃,降解速度就会加倍。仅在没有如蛋白变性等新的反应可能发
生的特定阈值温度时,这个数据才是真实的。在至少60 ℃的温度下,IVF 培养液中的白
蛋白都是稳定的,所以只要温度低于这个值,就可以使用阿伦尼乌斯方程。
如何计算平均动力学温度(MeanKinetic Temperature , MKT)
既然我们知道当温度上升+10 ℃,降解速率就会加倍,我们就可以对培养液的运输过程进行一些有趣的计算。假设举例稳定性研究显示培养液生产后12 周内是足够稳定可以用于胚胎培养的。如果制造商将培养液储存在一个很好的仓库内,在配送之前仓库的温度一直接近+2 ℃,相比稳定性研究测试,培养液“失效”就会变得更加缓慢。这就给了一定的余地,使得其后培养液可以存储于温度高于+8 ℃的条件下,且不会降解而无法使用。
制造商会在运输产品中放入带有自动记录功能的温度计,以此监测运输至世界各地时温度是如何变化的。当温度传感器把数据传回到制造商后,制造商会汇总每个时间段的温度对培养液的影响,并且计算出平均动力学温度(Mean Kinetic Temperature)—MKT。
这个方程看起来很复杂,它仅仅是在运输过程中计算每个测量周期反应速率的总和;然后再转换成温度,在该连续恒定的温度下培养液同期可降解到相同的程度。
作为单一值,平均动力学温度涵盖了温度带来的不利影响,并且可以表明,即使在运
输末尾阶段的温度高于+ 8 ℃,产品的实际平均温度所造成的不利影响也是比较低的,培
养液降解水平不会超过规定要求。
运输过程中温度的评估
正如上面所看到的,并非培养液运输结束时的温度来决定培养液是否可以使用。不是
每箱培养液运输过程中都有温度记录仪,但培养液制造商已经验证了每一个装运系统,以
使他们能够知道培养液运输长达6 天的时间内(取决于包装箱的大小和冰块的数量),
MKT 维持在一个可以接受的范围。
实际运输的最后3天零7小时的温度记录曲线,每10分钟记录一次
为了更好的理解,我们举一个简单的例子,初始温度为+2 ℃,最终温度达到+ 15 ℃。
通过使用MKT 计算方法,我们会把降解的绝大部分都归因于运输末段温度达到15 ℃,但其MKT 温度仅为5.5 ℃,该值是在安全限定以内的。通过Excel数据表很容易计算MKT,而且大多数温度记录仪的软件程度都整合了自动计算MKT 的功能。
除非培养液是异常地过热或过冷,通常在运输期间包装箱中的培养液是“新鲜”的,即
使是在到达目的地时培养液的温度感觉稍微升高一点。但是如果运输期间发生了延误,那
就是另一回事了,在到达目的地时,若培养液温度稍高,那么就需要检测培养液温度了。
如果培养液变温,这就表明培养液可能在很长一段时间内温度是很高的。在这种情况下,
最安全的措施就是与供货商联系并订购新的培养液。
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